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當(dāng)前位置:主頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 分子生物試劑 > 索萊寶 > BC3345糖原磷酸化酶 a(GPa)活性檢測(cè)試劑盒

糖原磷酸化酶 a(GPa)活性檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)要描述:糖原磷酸化酶 a(GPa)活性檢測(cè)試劑盒 本生試劑本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng),吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器。

  • 產(chǎn)品型號(hào):BC3345
  • 產(chǎn)       地:天津市
  • 更新時(shí)間:2024-08-22
  • 訪  問(wèn)  量:1278
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌產(chǎn)地國(guó)產(chǎn)
級(jí)別其他規(guī)格96T/48

  糖原磷酸化酶 a(GPa)活性檢測(cè)試劑盒

  微量法

  規(guī)格:100T/96S

  產(chǎn)品內(nèi)容:使用請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系工作人員。

  試劑名稱 規(guī)格 保存條件

  提取液 液體 110mL×1 瓶 2-8℃保存

  試劑一 液體 20mL×1 瓶 2-8℃保存

  試劑二 粉劑×1 支 2-8℃保存

  試劑三 粉劑×1 支 2-8℃保存

  試劑四 粉劑×1 支 -20℃保存

  試劑五 粉劑×2 支 -20℃保存

  試劑六 粉劑×2 支 -20℃保存

  溶液的配制:

  1、 試劑二:臨用加入 0.5 mL 蒸餾水,充分混勻;

  2、 試劑三:臨用加入 0.5 mL 蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存 4 周,避免反復(fù)凍融;

  3、 試劑四:臨用加入 1.25 mL 蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存 4 周,避免反復(fù)凍融;

  4、 試劑五:臨用取一支加入 1 mL 蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存 4 周,避免反復(fù)凍融;1 瓶粉劑即可做 100T,為延長(zhǎng)使用時(shí)間,故多給一支。

  5、 試劑六:臨用取一支加入 1 mL 蒸餾水,充分混勻;可分裝后-20℃保存 4 周,避免反復(fù)凍融;1 瓶粉劑即可做 100T,為延長(zhǎng)使用時(shí)間,故多給一支。

  6、 工作液的配制:臨用根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需用量,按照試劑一:試劑二:試劑三:試劑四:蒸餾水=148μL:4μL: 4μL: 4μL: 10μL(1T 的量)的比例,充分混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。

  產(chǎn)品說(shuō)明:

  糖原磷酸化酶是糖原分解代謝中的關(guān)鍵酶,催化糖原的磷酸化反應(yīng)。該酶分為有活性的糖原磷酸化酶 a

  (Glycogen phosphorylase a, GPa)和無(wú)活性的糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b, GPb)兩種形式。糖原的分解主要在糖原磷酸化酶 a 的催化下進(jìn)行。未添加激活劑時(shí),糖原磷酸化酶 a 催化糖原和無(wú)機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和 1-磷酸葡糖,磷酸葡萄糖變位酶和 6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化 NADP 還原生成 NADPH,在 340nm 下測(cè)定 NADPH 上升速率,即可反映糖原磷酸化酶 a 活性。

  注意:實(shí)驗(yàn)之建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

  需自備的儀器和用品:

  紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、冰和蒸餾水。

  操作步驟:

  一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

  1、組織:按照組織質(zhì)量(g)︰提取液體積(mL)為 1︰5~10 的比例(建議稱取約 0.1 g 組織,加入 1 mL 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后 8000 g,4℃,離心 10 min,取上清置于冰上待測(cè)。

  2、細(xì)菌或者細(xì)胞:先收集細(xì)胞或細(xì)菌樣本到離心管內(nèi),棄上清,按照每 500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次)。8000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

  3、血清(漿):直接檢測(cè)

  二、測(cè)定步驟

  1、 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340 nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

  2、 臨用工作液置于 37℃預(yù)熱 5min。

  3、 在微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中依次加入 10 μL 樣本、10 μL 試劑五、10 μL 試劑六、170 μL 工作液,充分混勻 10s,記錄 340nm 處 10s 時(shí)吸光值 A1,37℃水浴鍋或者恒溫培養(yǎng)箱反應(yīng) 10min(酶標(biāo)儀有控溫功能的可以調(diào)節(jié)溫度至 37℃),反應(yīng)后拿出迅速擦干測(cè)定 10min10s 時(shí)吸光值 A2。計(jì)算 ΔA=A2-A1。

  糖原磷酸化酶 a(GPa)活性檢測(cè)試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。本生試劑盒


 


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