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ELISA試劑盒的標準品如何使用
以下是關于?ELISA試劑盒標準品使用?的詳細操作指南,本生小編結合實驗關鍵步驟與注意事項:
一、標準品配制步驟?
試劑平衡?
將標準品及稀釋液置于室溫平衡 ?30分鐘?,避免溫度差異影響濃度準確性?。
梯度稀釋?
按說明書要求,用標準品稀釋液將標準品原液進行 ?系列稀釋?(如1:2、1:4等),通常需配制 ?7-8個梯度?(如S1-S7)?。
示例:若原液濃度為1000 pg/mL,稀釋后梯度可為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625 pg/mL?。
加樣操作?
每梯度標準品加入 ?50-100μL/孔?(與樣本量一致),空白孔僅加稀釋液?。
二、關鍵注意事項?
避免污染?
使用一次性吸頭,不同梯度標準品需更換吸頭,防止交叉污染?。
時間控制?
標準品工作液需現配現用,避免長時間放置導致降解?。
數據驗證?
標準曲線應滿足 ?R2≥0.99?,若曲線不佳需檢查稀釋步驟或試劑活性?。
三、常見問題處理?
問題? ?解決方案?
標準曲線線性差 重新配制稀釋液,確保梯度均勻?
標準品顯色異常 檢查試劑有效期及儲存條件(2-8℃避光)?
通過規(guī)范操作可確保標準品數據的可靠性,具體參數請以試劑盒說明書為準?。
注意:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循試劑盒說明書,避免交叉污染,并確保樣本處理(如離心、稀釋)符合要求?。
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